Summary
本发明涉及土壤微生物学,具体说是一种能够提高DNA质量的土壤样品总DNA提取方法。具体为:向土壤样品中加入DNA提取缓冲液,再加入蛋白酶K,-65℃~65℃冻融后离心,弃沉淀,收集上清液;用等体积的苯酚-氯仿-异戊醇抽提、离心,取水相;再用氯仿-异戊醇抽提一次;加入醋酸钠和冷异丙醇,离心,收集DNA沉淀,经乙醇润洗后室温干燥,加入TE缓冲液溶解,得到DNA粗提液;向粗提液中加入DNA提取缓冲液,再加入等体积的苯酚-氯仿-异戊醇抽提,并重复上述沉淀、润洗、干燥、溶解等步骤,即获得较高质量的DNA。采用本发明方法可有效去除DNA中所含的一些杂质,使DNA的纯度以及质量获得显著提高。
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Institution中国科学院沈阳应用生态研究所