HPLC-MS/MS间接测定类风湿关节炎患者红细胞中多聚谷氨酸化甲氨蝶呤的浓度

摘要

目的建立检测类风湿关节炎患者红细胞中多聚谷氨酸化甲氨蝶呤(methotrexate polyglutamates,MTXPGs)浓度的HPLC-MS/MS法。方法采用间接测定法,以同位素甲氨蝶呤-d3为内标,分别测定游离甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)和总MTX(MTX+MTXPGs),从而计算出红细胞中MTXPGs浓度。为测定游离MTX,全血样品经反复冻融、甲醇沉淀蛋白后,经LC-MS/MS进样分析,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应监测(MRM)。为测定总MTX,样品(反复冻融后)与200mmol·L~(-1)抗坏血酸37℃孵育2. 5 h,酶促MTXPGs转化为MT...

关键词