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小鼠精原细胞分选方法改良的研究

李堃; 刘悦; 黄鹏; 杨智昉; 胡茜; 张颖; 李志宏; 吕叶辉; 梁乐
中国知网
上海交通大学医学院

摘要

目的:通过特异抗体结合的磁珠分选,改进小鼠未分化和分化中两类精原细胞分选方法。方法:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术,分别将出生后7 d雄性小鼠睾丸中的Thy1~+细胞和c-Kit~+细胞分别做为未分化和分化中的精原细胞分选出来,利用免疫荧光技术和流式细胞术,检测两种精原细胞的纯度,利用实时荧光定量PCR检测两种精原细胞中Gfrα1、Plzf、c-kit和sohlh2 mRNA的表达差异来鉴定两种精原细胞,并将Thy1~+细胞进行原代细胞培养。结果:Thy1~+细胞和c-Kit~+细胞的分选纯度分别达到(85.6±8.35)%和(89.40±2.77)%(P<0.01)。...

关键词

精原细胞 分化中 未分化 磁珠分选 小鼠 spermatogonia differentiated undifferentiated magnetic bead sorting mouse