抗Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1蛋白单克隆抗体表位的鉴定

作者：吴晓颖; 葛铭; 张云

来源：黑龙江畜牧兽医, 2013, (03): 15-18.

• Ⅰ型鸭肝炎病毒
• 抗VP1蛋白单克隆抗体
• 噬菌体展示
• 抗原表位 duck hepatitis virus type Ⅰ(DHV-Ⅰ)
• monoclonal antibody against VP1 protein
• phage display
• epitope

为了筛选Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck viral hepatitis typeⅠ,DVH-Ⅰ)VP1蛋白的抗原表位,试验应用噬菌体展示随机12肽库试剂盒,以抗DHV-ⅠVP1蛋白单克隆抗体纯化IgG作为靶标,通过ELISA和竞争抑制ELISA鉴定筛选克隆的结合特性,并对阳性克隆提取DNA进行测序分析。结果表明:通过3轮生物淘洗后,目标噬菌体得到282倍富集;随机挑选15个克隆进行测序分析及ELISA和竞争抑制ELISA检测,其中有8个噬菌体克隆可以与抗DVH-ⅠVP1蛋白单克隆抗体高度特异性结合,8个克隆的共有氨基酸序列为GMMIP。说明共有序列GMMIP可能是单克隆抗体2D5所识别的VP1蛋白的线性表位。

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所