雷帕霉素对LPS刺激RAW264.7细胞炎症因子TNF-α和IL-1β表达的影响

Authors：潘浩; 徐丽慧; 宋方茗; 王遥; 曾龙辉; 何贤辉; 欧阳东云

Source：现代免疫学, 2013, (05): 387-392.

• 雷帕霉素
• 细菌脂多糖
• RAW 264.7细胞
• 细胞因子
• 免疫调节 rapamycin
• lipopolysaccharide
• RAW 264.7cells
• cytokines
• immunomodulation

探讨雷帕霉素(RAPA)对LPS诱导的小鼠RAW 264.7巨噬细胞炎症因子表达的调节效应及可能机制。采用胞内细胞因子染色法检测炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,以RT-PCR检测细胞因子mRNA水平,免疫印迹法检测mTOR底物(4E-BP1、p70S6K和AKT)及NF-κB的活化水平。结果显示,RAPA上调LPS诱导的细胞内TNF-α和IL-1β蛋白的表达,低浓度RAPA时上调效应更为显著。在mRNA水平,LPS+RAPA处理组与LPS刺激组相比,在LPS刺激1h和6h时,TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平没有显著差异,低浓度RAPA预处理组与高浓度RAPA预处理组之间也没有明显差异。同时,LPS激活细胞内mTOR信号通路,RAPA处理可完全抑制p70S6K的活化(磷酸化),却上调4E-BP1和AKT的磷酸化,且低浓度RAPA的上调效应显著高于高浓度RAPA。此外,低浓度RAPA还上调LPS诱导NF-κB(p65)的活性。结果表明,RAPA浓度依赖性上调LPS激活的炎症因子表达可能与其差异调控mTOR下游底物和NF-κB信号通路有关。

• Institution
  暨南大学; 广西医科大学