氟对成骨细胞Saos-2 DNA甲基化的影响

作者：秦纹; 马红; 张美林; 陈龙; 张美玉; 钟近洁

来源：新疆医科大学学报, 2021, (01): 49-54.

• 氟化钠
• 成骨细胞
• DNA甲基化

目的 观察氟化钠（NaF）对成骨细胞的毒性效应，及在毒性作用过程中对DNA甲基化效应的影响。方法 0、2.5、5、10、20、40 mg/LNaF分别干预骨肉瘤细胞（Saos-2）24、48、72、96 h后,噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞的增殖活力；流式细胞仪法检测72 h细胞的增殖活力；基因芯片检测细胞的DNA甲基化程度；实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测染氟成骨细胞DNMTl、Runx2、Osterix基因mRNA的表达情况。结果 MTT实验中染氟72、96h时，5 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的促进作用（P<0.05）；≥72 h时，20 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的抑制作用（P<0.05），且随着NaF剂量的增大和时间的延长对细胞增殖活力的抑制逐渐增强。流式细胞仪实验中2.5、5 mg/L的NaF对成骨细胞Saos-2的增殖活力较0 mg/L组有明显的促进作用（P<0.05）；≥20 mg/L的NaF较0 mg/L组明显抑制成骨的增殖作用。5 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNA甲基化程度较0 mg/L组明显的降低（P<0.05）；≥20 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNA甲基化程度较0 mg/L组明显的增高。5 mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNMT1的表达量较0 mg/L组明显降低，Runx2、Osterix的表达量较0 mg/L组明显的增高（P<0.05）；≥20mg/L的NaF作用成骨细胞Saos-2后DNMT1的表达量较0 mg/L组明显升高，Runx2、Osterix的表达量较0 mg/L组明显的降低。结论 低剂量的氟对Saos-2的增殖有明显的促进作用，高剂量的氟对Saos-2的增殖有明显的抑制作用，且随着剂量的增大和时间的延长对细胞增殖活力的抑制逐渐增强。低剂量的氟可能抑制DNMT1的表达，降低Saos-2的甲基化程度，一定程度上促进了骨基因Runx2、Osterix的表达。高剂量的氟可能促进DNMT1的表达，增高Saos-2的甲基化程度，一定程度上抑制骨基因Runx2、Osterix的表达。

• 单位
  浙江大学; 新疆医科大学基础医学院