平末端DNA随机连接构建重组质粒

Authors：ZHA Xiang Dong; LIU Yang; WU Di; LU Ying Hu; LIANG Lin; CHEN Qing Feng School of Life Sciences; Anhui University; Hefei; Electronic Engineering Institute of PLA; Hefei; China

Source：生物技术通讯, 2012, (01): 109-111.

• 平末端DNA
• 随机连接
• DNA拼接
• 基因克隆

目的:拼接DNA片段并克隆。方法:用T4DNA连接酶将DNA片段以平末端随机连接,随后用限制性内切酶切割,琼脂糖电泳分离酶切产物,挑选特定片段纯化回收,与线性化的载体质粒连接,转化大肠杆菌感受态细胞。结果:通过以上步骤,成功拼接了不同DNA片段,构建了含有目的拼接片段的重组质粒。结论:该方法简便、易行、可靠,可作为拼接、克隆DNA的备选方案,在分子生物学研究和基因工程中应用。

• Institution
  安徽大学; 生命科学学院; 中国人民解放军电子工程学院