摘要
采用Genome walking方法从辣椒基因组DNA中分离获得辣椒CaWRKY5基因上游的启动子序列,命名为CaWRKY5p.为了分析CaWRKY5p对病原菌和机械损伤的应答以及可能的调控区域,将该基因5’端顺序4个不同缺失片段分别与GUS报告基因相融合构成表达载体,在农杆菌介导的烟草叶片瞬间表达系统中表达.结果表明:启动子TATA框为起始密码子ATG上游-140 bp至-136 bp之间的TATATAA,同时含有多种与逆境胁迫相关的顺式作用元件,如W-box、S-box、MeJA应答元件和ABRE类似元件等;CaWRKYK5基因上游-936 bp启动子可以应答青枯病菌、抗病信号分子以及机械损伤;CaWRKY5p应答青枯病菌和茉莉酸甲酯(MeJA)的核心元件可能位于启动子-886 bp至-489 bp之间,应答乙烯(ET)核心调控区域位于-936 bp和-886 bp之间,而应答机械损伤的核心元件位于启动子-336 bp以及ATG之间.
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单位福建农林大学; 生命科学学院