用于哺乳动物细胞转染的高纯度质粒DNA的制备

摘要

目的:建立简便高效、成本低廉和安全无污染的高纯度质粒提取方法。方法:在乙酸铵方法的基础上加以改进,主要改进之处在于增加了用聚乙二醇纯化质粒的步骤,并对溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的成分和具体实验参数也做了合理的改进,以最少的步骤,充分去除了残存杂质,保证了质粒的超纯状态。结果:用本方法提取的质粒与用QIAGEN plasmid midiKit提取的质粒在理化指标上没有差别,对哺乳动物胞具有同样的转染效率。结论:本方法可完全取代QIAGEN公司的试剂盒用于提取超纯质粒。

关键词