福建柏无性系ISSR-PCR反应体系的建立

作者:张金玉; 肖祥希; 吴国欣; 何文广; 余孟杨; 杨宗武
来源:林业勘察设计, 2013, (02): 66-71.

摘要

福建柏无性系ISSR-PCR反应体系的模板,引物,taq酶,甲酰胺及程序中的退火温度,循环数等优化实验结果表明:福建柏ISSR-PCR反应最适体系为2.0μL 5μM引物,1.0μL 35ng/μL DNA模板,12.5μL 2×Reaction Mix,0.75U 2.5U/μL Golden DNA Polymerase,2.0%甲酰胺总反应体系为25μL。ISSR-PCR反应最适程序为:94℃预变性3min;94℃变性30s;48.5℃退火30s;72℃延伸1min,35个循环;72℃再次延伸5min。

  • 单位
    生命科学学院; 福建师范大学