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南瓜SSR-PCR反应体系的优化

孟令君; 李柱刚; 韩俊岩; 王珣; 陆杰; 付玉杰
中国知网
东北林业大学; 黑龙江省农业科学院

摘要

以3个矮生南瓜自交系和2个蔓生南瓜自交系为试材,利用Primer 5软件开发南瓜植物中具有特异性的SSR引物,并通过正交实验和梯度PCR试验对影响南瓜SSR-PCR结果的主要条件进行优化筛选,以期建立最佳的SSR-PCR反应体系。结果表明:20μL反应体系含有1.5mmol/L Mg2+,60ng DNA,0.20mmol/L dNTPs,0.25mmol/L Primer和1.5UTaq酶,最佳退火温度为44.1℃。

关键词

南瓜 SSR-PCR 正交实验 体系优化 Cucurbita moschata SSR-PCR orthogonal experiment system optimization