牛妊娠相关糖蛋白BoPAG1的制备及生物信息学分析

作者：杨亚军; 王震; 张洁; 徐明国; 陈创夫

来源：生物技术, 2019, (01): 29-34+89.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.01.0006

• 妊娠相关糖蛋白
• 原核表达
• Western Blot
• 生物信息学分析

[目的]获得高效表达并且抗原性较好的BoPAG1(bovin Pregnancy associated glycoproteins 1)蛋白,并分析其生物信息学功能。[方法]扩增荷斯坦奶牛BoPAG1基因,并将其连接在表达载体pET-30a,并转化至大肠杆菌(DE3)中表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用生物信息学方法对BoPAG1基因编码蛋白的蛋白修饰、结构、线性B细胞抗原表位进行预测分析。并对不同物种间的PAG1以及荷斯坦奶牛BoPAG的氨基酸做同源性分析。[结果]成功克隆BoPAG1基因并表达相应蛋白,大小与预期结果相符,预测BoPAG1蛋白具有18个B细胞抗原表位,其N端具有15个氨基酸组成的信号肽,并且有4处N连接糖基化,不同物种间PAG1氨基酸的同源性为95. 1%～97. 9%,BoPAG蛋白家族氨基酸的同源性为86. 4%～97. 2%。[结论]成功表达并纯化获得了BoPAG1蛋白。BoPAG1蛋白N连接糖基化有4处并且预测出18个B细胞抗原表位以及15个氨基酸组成的信号肽。不同物种间PAG1及BoPAG蛋白家族同源性较高。为BoPAG1蛋白抗体的制备和功能的研究提供了基础。

• 单位
  石河子大学; 生命科学学院