农杆菌介导的绿木霉遗传转化及重寄生缺陷突变体的筛选

Authors：刘连盟; 王玲; 黄世文; 侯恩庆; 肖丹凤

Source：基因组学与应用生物学, 2013, (05): 562-568.

• 绿木霉
• 农杆菌介导的转化
• pCATPH-Ⅰ
• 重寄生
• 重寄生缺陷突变体 Trichoderma virens
• Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation
• pCATPH-Ⅰ
• Hyperpara-sitism
• Mycoparasitism
• Mutant defective in hyperparasitism

绿木霉(Trichoderma virens)是一种重要菌寄生真菌,该菌已广泛应用于多种病害的生物防治上。本研究构建了双元载体pCATPH-Ⅰ(GenBank登录号为:KC252999),并利用该载体成功实现了农杆菌介导的绿木霉遗传转化,转化效率可达385~460个转化子/106绿木霉分生孢子。转化子的PCR和遗传稳定性分析表明,T-DNA已整合进该菌的基因组中且在无选择压力的条件下能够稳定遗传。利用该转化体系成功建立了超过2 000个转化子的转化子库,通过转化子与病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)对峙培养在该转化子库中成功筛选到两个重寄生缺陷突变体,D441和A281。本研究的完成可为绿木霉的功能基因组学及重寄生分子机制的研究打下基础。

• Institution
  广西大学; 中国水稻研究所