麦胚系统真核表达小鼠伯氏疟原虫TIP样蛋白的实验研究

摘要

目的体外真核表达小鼠伯氏疟原虫TIP样蛋白(PbTIP)胞外域重组蛋白。方法合成PbTIP胞外域DNA片段,克隆入真核表达载体pEU-E01-His-TEV-MCS,采用CFS真核无细胞蛋白表达系统(麦胚系统),在体外表达可溶性PbTIP胞外域重组蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳和Western-blot检测并鉴定目的蛋白表达情况。结果获得了可溶性表达的PbTIP胞外域重组蛋白,分子量约70 000 Mr,与预期相符,目的蛋白浓度约为0.1 mg/ml。结论采用麦胚系统在体外获得了较高浓度的可溶性PbTIP胞外域重组蛋白,不但为后续的PbTIP胞外域功能研究打下了良好的基础,也为众多疟原虫未知蛋白的功能研究提供了新的方法。

关键词