Euprosthenops australis牵引丝蛋白的原核表达

作者：张秀丽; 陈格飞; 林瑛; 李佳; 孟清

来源：生命科学研究, 2013, (01): 14.

• 4Rep
• 基因克隆
• 融合蛋白
• 原核表达 4Rep
• gene clone
• fusion protein
• prokaryotic expression

参照GenBank收录的牵引丝蛋白编码序列,经过密码子优化,人工合成3段cDNA序列:NT、CT和4Rep,由Ⅰ型限制性内切酶BsaⅠ和BspMⅠ介导无缝拼接,分别构建4RepCT、NT4RepCT、NT8RepCT和NT12RepCT重组模块.通过改造表达载体和优化培养温度,成功提高了4RepCT的表达量(30 mg/L).另外还首次成功表达NT4RepCT和NT8RepCT重组蛋白模块,表达量分别为21 mg/L和8.5 mg/L.4RepCT表达量的提高及NT4RepCT和NT8RepCT的成功表达证实了融合标签TRX有利于提高蛛丝蛋白的表达水平,为E.australis全长牵引丝蛋白的表达奠定了基础.

• 单位
  东华大学