不同热处理方法对鲤鱼DNA的影响及不同DNA提取方法的比较

作者：ZHANG BinTian; DU Xin; JIA SuPing; HE JunHui & GUO LiangHong State Key Laboratory of Environmental Chemistry; Ecotoxicology; Research Center for Eco Environmental Sciences; Chinese Academy of Sciences; Beijing; China Functional Nanomaterials Laboratory; Key Laboratory of Organic Optoelectronic Functional Materials; Molecular Engineering; Technical Institute of Physics; Chemistry; Chinese Academy of Sciences; Beijing; China

来源：中国食品卫生杂志, 2011, 23(03): 245-248.

• 加热时间
• 鲤鱼DNA
• DNA提取方法
• 荧光定量聚合酶链反应

目的研究不同加热方法处理后鲤鱼基因组DNA长度和含量的变化,并对4种DNA提取方法进行比较。方法用电磁炉和微波炉将鲤鱼背部肌肉加热煮沸1、2、3 h取出,再分别用酚氯仿法、Wizard试剂盒法、磁珠法和离心柱法提取处理前后鲤鱼基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳对处理前后的总DNA长度进行比较,再用实时荧光定量PCR法检测所得DNA样品中内参基因β-actin含量的变化。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,处理后DNA片段明显降解。生鱼肉提取β-actin的量为1 070 213.39拷贝/μl,电磁炉处理1、2、3 h的浓度分别为143 309.6、441 350.43和256 994.16拷贝/μl,微波炉处理1、2、3 h的浓度分别为269 121.17、267 371.16和134 649.97拷贝/μl。酚氯仿法、Wizard试剂盒法、离心柱法和磁珠法提取的平均DNA浓度分别为718 944.93、737 945.64、26 751.22和2 934.06拷贝/μl。结论加热煮沸导致DNA降解,因此加工食品中DNA的检测应当选择较短的目标片段。4种DNA提取方法比较,Wizard试剂盒法和酚氯仿法提取的DNA浓度显著高于离心柱法和磁珠法,且离心柱法又高于磁珠法。

• 单位
  北京联合大学; 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所