IGFBP2基因表达载体构建及抗血清制备

摘要

为了研究类胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)基因在鸡脂肪细胞代谢中的功能,试验构建鸡IGFBP2基因的原核表达载体并制备鸡IGFBP2基因的多克隆抗体,采用RT-PCR的方法扩增鸡IGFBP2基因的cDNA片段并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,利用IPTG诱导重组原核表达载体pGEX-4T-1/IGFBP2在大肠杆菌BL21中表达融合蛋白,利用谷胱甘肽Sepharose 4B层析柱对融合蛋白进行纯化,免疫家兔,利用ELISA和Western-blot方法对抗体血清的效价进行检测。结果表明:试验免疫家兔获得了效价较高的鸡IGFBP2基因抗体血清。

关键词