基于DNA杂交链式反应和杂交空位的无标记荧光检测DNA研究

作者：徐杰; 林滨; 王亚; 徐志爱; 程桂英; 张文

来源：分析化学, 2018, 46(7).

DOI：10.11895/j.issn.0253-3820.181142

• 杂交链式反应
• 杂交空位
• 荧光
• 信号放大
• 无标记

基于DNA杂交链式反应(Hybridization chain reaction, HCR)的信号放大策略,通过在参与HCR反应的发夹型DNA中设计一个特殊碱基,HCR反应后,该碱基对位出现杂交空位,利用杂交空位与荧光小分子(2-Amino-5,6,7-trimethyl-1,8-naphthyridine, ATMND)特异性结合产生的荧光淬灭效应,构建了一种无标记、无酶、灵敏的DNA检测体系.利用凝胶电泳和原子力显微镜等对目标DNA 引发两个发夹型DNA交替自组装形成的超级长链进行了表征.通过对杂交盐浓度和ATMND浓度等条件的优化,获得了满意结果.相比于未利用此放大信号策略的分析方法,灵敏度提高了两个数量级,目标DNA浓度在5. 0~72. 7 nmol/L 浓度范围内与荧光比值(F/F0)呈现良好的线性关系,检出限为2. 0 nmol/L.

• 单位
  华东师范大学; 山东师范大学