一种活细胞内原位加速的DNA马达及其制备方法和应用
西安交通大学
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摘要
1.一种活细胞内原位加速的DNA马达,其特征在于,以金纳米颗粒AuNP作为载体,并在其上负载三种DNA链;所述三种DNA链分别为:第一DNA链,为发生运动过程的DW链,其3’端的巯基共价连接金纳米颗粒AuNP;第二DNA链,为带有化学标记的DT链,其为DNA茎环结构,在该DNA茎环结构的环状部分含有一个8-氧-7-氢脱氧鸟嘌呤oG或次黄嘌呤I损伤碱基位点,茎环结构茎部 3’端的巯基共价连接金纳米颗粒AuNP,5’端修饰荧光分子TAMRA或FAM;第三DNA链,为带有化学标记的R链,其为DNA茎环结构,在该DNA茎环结构环状部分含有一个脱嘌呤/脱嘧啶AP位点,其茎部 3’端的巯基共价连接金纳米颗粒AuNP,5’端修饰荧光分子Cy5;其中,第一DNA链即DW链的5’端的14个碱基与第二DNA链即DT链的环状部分的14个碱基互补;第一DNA链即DW链的5’端的14个碱基与第二DNA链即DT链的环状部分互补成双链DNA;DT链上的损伤碱基位点oG或I能被人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶hOGG1或人类烷基腺嘌呤DNA 糖基化酶hAAG作用成为脱嘌呤/脱嘧啶AP位点,再由人源脱嘌呤/脱嘧啶AP核酸内切酶APE 1酶切后,释放出荧光;R链上的脱嘌呤/脱嘧啶AP位点,直接由人源脱嘌呤/脱嘧啶AP核酸内切酶APE 1酶切后,释放出荧光。
关键词
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