副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析

作者：李艳玲; 李建军; 周泷; 崔宁; 刘娇; 张艳禾; 李刚; 谢芳; 王春来

来源：中国预防兽医学报, 2013, (06): 449-452.

• 副猪嗜血杆菌
• CdtC亚基
• 细胞毒性 Haemophilus parasuis
• cytolethal distending toxin CdtC
• cytotoxicity

细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学