摘要
目的:优化分析法夫酵母类胡萝卜素的液相色谱溶剂组成及梯度,改善法夫酵母类胡萝卜素的分离效果,提高虾青素、β-胡萝卜素及其他类胡萝卜素测定的准确性。方法:用Waters1525液相色谱仪及Nova-PakC18柱,在柱温30℃,流速1.0mL/min,检测波长474nm,进样量20μL的条件下做试验。以液相色谱函数(COF)为指标评价分离效果,先用混料试验优化液相色谱有机相,再优化有机相的初始浓度及梯度上升时间。结果:优化得到有机相的组成为53%甲醇,36%四氢呋喃,11%乙腈;优化得到的有机相梯度条件是0~40 min65%~100%,40~45 min100%~65%,45~48 min65%;优化的色谱溶剂及梯度大大改善了法夫酵母类胡萝卜素的分离效果,从提取物中共检测出43种成分,虾青素和β-胡萝卜素与相邻的物质都达到基线分离。用这种方法同时测定虾青素和β-胡萝卜素,具有检测限低,重复性好和精确度高的特点。该方法还可以用于检测法夫酵母合成的其它类胡萝卜素成分及降解成分。
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单位Jimei University